মোমবাতি ও সাবান তৈরির জন্য বিশুদ্ধ স্যাপোশনিকোভিয়া ডিভারিকাটা তেল, রিড বার্নার ডিফিউজারের জন্য নতুন পাইকারি ডিফিউজার এসেনশিয়াল অয়েল।

সংক্ষিপ্ত বিবরণ:

 

২.১. এসডিই প্রস্তুতি

হানহার্ব কোং (গুরি, কোরিয়া) থেকে এসডি-র রাইজোম শুকনো ভেষজ হিসেবে কেনা হয়েছিল। কোরিয়া ইনস্টিটিউট অফ ওরিয়েন্টাল মেডিসিন (KIOM)-এর ডঃ গো-ইয়া চোই উদ্ভিদ উপাদানগুলোর শ্রেণিবিন্যাস নিশ্চিত করেন। একটি ভাউচার নমুনা (নম্বর 2014 SDE-6) কোরিয়ান হার্বেরিয়াম অফ স্ট্যান্ডার্ড হার্বাল রিসোর্সেস-এ জমা দেওয়া হয়েছিল। এসডি-র শুকনো রাইজোম (৩২০ গ্রাম) ৭০% ইথানল দিয়ে দুইবার নিষ্কাশন করা হয়েছিল (২ ঘন্টা রিফ্লাক্স সহ) এবং এরপর নিষ্কাশিত নির্যাসটি কম চাপে ঘনীভূত করা হয়েছিল। ক্বাথটি ফিল্টার করে, লাইওফিলাইজ করে ৪° সেলসিয়াস তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। অপরিশোধিত কাঁচামাল থেকে শুকনো নির্যাসের ফলন ছিল ৪৮.১৩% (ওজন/ওজন)।

 

২.২. পরিমাণগত উচ্চ-কার্যক্ষমতা সম্পন্ন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (এইচপিএলসি) বিশ্লেষণ

একটি এইচপিএলসি সিস্টেম (ওয়াটার্স কোং, মিলফোর্ড, এমএ, ইউএসএ) এবং একটি ফটোডায়োড অ্যারে ডিটেক্টর ব্যবহার করে ক্রোমাটোগ্রাফিক বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। এসডিই-এর এইচপিএলসি বিশ্লেষণের জন্য, প্রাইম-O-গ্লুকোসিলসিমিফুগিন স্ট্যান্ডার্ডটি কোরিয়া প্রোমোশন ইনস্টিটিউট ফর ট্র্যাডিশনাল মেডিসিন ইন্ডাস্ট্রি (গিয়ংসান, কোরিয়া) থেকে ক্রয় করা হয়েছিল, এবংসেক-ও-গ্লুকোসিলহামাউডল এবং 4′-O-β-ডি-গ্লুকোসিল-৫-Oআমাদের গবেষণাগারে এল-মিথাইলভিসামিনল পৃথক করা হয়েছিল এবং বর্ণালী বিশ্লেষণের মাধ্যমে, প্রধানত এনএমআর (NMR) এবং এমএস (MS) দ্বারা শনাক্ত করা হয়েছিল।

এসডিই নমুনা (০.১ মিলিগ্রাম) ৭০% ইথানল (১০ মিলি) -এ দ্রবীভূত করা হয়েছিল। একটি এক্সসিলেক্ট এইচএসএস টি৩ সি১৮ কলাম (৪.৬ × ২৫০ মিমি, ৫) ব্যবহার করে ক্রোমাটোগ্রাফিক পৃথকীকরণ করা হয়েছিল।μm, ওয়াটার্স কোং, মিলফোর্ড, এমএ, ইউএসএ)। মোবাইল ফেজটি অ্যাসিটোনাইট্রাইল (A) এবং জলে ০.১% অ্যাসিটিক অ্যাসিড (B) দ্বারা গঠিত ছিল, যার প্রবাহের হার ছিল ১.০ মিলি/মিনিট। একটি বহু-ধাপের গ্রেডিয়েন্ট প্রোগ্রাম নিম্নরূপে ব্যবহার করা হয়েছিল: ৫% A (০ মিনিট), ৫–২০% A (০–১০ মিনিট), ২০% A (১০–২৩ মিনিট), এবং ২০–৬৫% A (২৩–৪০ মিনিট)। ডিটেকশন ওয়েভলেংথ ২১০–৪০০ nm পর্যন্ত স্ক্যান করা হয়েছিল এবং ২৫৪ nm-এ রেকর্ড করা হয়েছিল। ইনজেকশন ভলিউম ছিল ১০.০ মিলি/মিনিট।μতিনটি ক্রোমোন নির্ণয়ের জন্য আদর্শ দ্রবণ 7.781 mg/mL (প্রাইম-) চূড়ান্ত ঘনত্বে প্রস্তুত করা হয়েছিল।O-গ্লুকোসিলসিমিফিউজিন), ৩১.১২৫ মিলিগ্রাম/মিলি (৪′-O-β-ডি-গ্লুকোসিল-৫-O-মিথাইলভিসামিনল), এবং ৩১.১২৫ মিলিগ্রাম/মিলি (সেক-ও-গ্লুকোসিলহামাউডল) মিথানলে দ্রবীভূত করে ৪° সেলসিয়াস তাপমাত্রায় রাখা হয়েছিল।

২.৩. প্রদাহ-বিরোধী কার্যকলাপের মূল্যায়নইন ভিট্রো

২.৩.১. কোষ কালচার এবং নমুনা প্রক্রিয়াকরণ

RAW 264.7 কোষগুলো আমেরিকান টাইপ কালচার কালেকশন (ATCC, ম্যানাসাস, ভিএ, ইউএসএ) থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং ১% অ্যান্টিবায়োটিক ও ৫.৫% এফবিএস (FBS) যুক্ত ডিএমইএম (DMEM) মাধ্যমে প্রতিপালন করা হয়েছিল। কোষগুলোকে ৩৭° সেলসিয়াস তাপমাত্রায় ৫% CO2 যুক্ত আর্দ্র পরিবেশে ইনকিউবেট করা হয়েছিল। কোষগুলোকে উদ্দীপিত করার জন্য, মাধ্যমটি তাজা ডিএমইএম (DMEM) মাধ্যম দিয়ে প্রতিস্থাপন করা হয়েছিল এবং লিপোপলিস্যাকারাইড (LPS, সিগমা-অলড্রিচ কেমিক্যাল কোং, সেন্ট লুইস, এমও, ইউএসএ) ১% হারে যোগ করা হয়েছিল।μSDE (200 বা 400) এর উপস্থিতিতে বা অনুপস্থিতিতে g/mL যোগ করা হয়েছিল।μঅতিরিক্ত ২৪ ঘন্টার জন্য (g/mL)।

২.৩.২. নাইট্রিক অক্সাইড (NO), প্রোস্টাগ্ল্যান্ডিন E2 (PGE2), টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর-এর নির্ণয়α(টিএনএফ-)α), এবং ইন্টারলিউকিন-৬ (IL-6) উৎপাদন

কোষগুলোকে SDE দিয়ে ট্রিট করা হয়েছিল এবং 24 ঘন্টার জন্য LPS দিয়ে উদ্দীপিত করা হয়েছিল। পূর্ববর্তী একটি গবেষণা অনুসারে গ্রিস রিএজেন্ট ব্যবহার করে নাইট্রাইট পরিমাপের মাধ্যমে NO উৎপাদন বিশ্লেষণ করা হয়েছিল [12প্রদাহ সৃষ্টিকারী সাইটোকাইন PGE2, TNF- এর নিঃসরণαএবং প্রস্তুতকারকের নির্দেশাবলী অনুসারে একটি ELISA কিট (R&D সিস্টেমস) ব্যবহার করে IL-6 নির্ধারণ করা হয়েছিল। Wallac EnVision ব্যবহার করে 540 nm বা 450 nm-এ NO এবং সাইটোকাইন উৎপাদনের উপর SDE-এর প্রভাব নির্ধারণ করা হয়েছিল।™মাইক্রোপ্লেট রিডার (পারকিনএলমার)।

২.৪. অস্টিওআর্থারাইটিস-বিরোধী কার্যকলাপের মূল্যায়নইন ভিভো

২.৪.১. প্রাণী

স্যামটাকো ইনকর্পোরেটেড (ওসান, কোরিয়া) থেকে ৭ সপ্তাহ বয়সী পুরুষ স্প্রাগ-ডাওলি ইঁদুর কেনা হয়েছিল এবং একটি ১২-ঘণ্টার আলো/অন্ধকার চক্রসহ নিয়ন্ত্রিত পরিবেশে রাখা হয়েছিল।°C এবংআর্দ্রতা %। ইঁদুরদের পরীক্ষাগারের খাবার এবং জল সরবরাহ করা হয়েছিল।ইচ্ছামতসমস্ত পরীক্ষামূলক পদ্ধতি ন্যাশনাল ইনস্টিটিউটস অফ হেলথ (NIH)-এর নির্দেশিকা মেনে সম্পাদিত হয়েছিল এবং দেজিয়ন বিশ্ববিদ্যালয়ের (দেজিয়ন, কোরিয়া প্রজাতন্ত্র) প্রাণী যত্ন ও ব্যবহার কমিটি কর্তৃক অনুমোদিত হয়েছিল।

২.৪.২. ইঁদুরে MIA দ্বারা OA প্রবর্তন

গবেষণা শুরুর আগে প্রাণীগুলোকে দৈবচয়নের মাধ্যমে চিকিৎসা দলগুলোতে ভাগ করা হয়েছিল।প্রতি গ্রুপে)। এমআইএ দ্রবণ (৩ মিলিগ্রাম/৫০μকেটামিন এবং জাইলাজিনের মিশ্রণ দ্বারা সৃষ্ট অ্যানেস্থেসিয়ার অধীনে ডান হাঁটুর ইন্ট্রা-আর্টিকুলার স্পেসে সরাসরি ০.৯% স্যালাইনের দ্রবণ ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। ইঁদুরগুলোকে এলোমেলোভাবে চারটি গ্রুপে ভাগ করা হয়েছিল: (১) MIA ইনজেকশন ছাড়া স্যালাইন গ্রুপ, (২) MIA ইনজেকশনসহ MIA গ্রুপ, (৩) MIA ইনজেকশনসহ SDE-চিকিৎসিত গ্রুপ (২০০ মিগ্রা/কেজি), এবং (৪) MIA ইনজেকশনসহ ইন্ডোমেথাসিন- (IM-) চিকিৎসিত গ্রুপ (২ মিগ্রা/কেজি)। MIA ইনজেকশনের ১ সপ্তাহ আগে থেকে ৪ সপ্তাহ ধরে ইঁদুরগুলোকে মুখে SDE এবং IM প্রয়োগ করা হয়েছিল। এই গবেষণায় ব্যবহৃত SDE এবং IM-এর ডোজ পূর্ববর্তী গবেষণায় ব্যবহৃত ডোজের উপর ভিত্তি করে নির্ধারণ করা হয়েছিল।10,13,14].

২.৪.৩. পশ্চাৎপদের ওজন বন্টনের পরিমাপ

অস্টিওআর্থ্রাইটিস (OA) প্ররোচিত করার পর, পেছনের পায়ের ওজন বহন ক্ষমতার মূল ভারসাম্য বিঘ্নিত হয়েছিল। ওজন বহন সহনশীলতার পরিবর্তন মূল্যায়ন করার জন্য একটি ইনক্যাপাসিটেন্স টেস্টার (লিন্টন ইন্সট্রুমেন্টেশন, নরফোক, ইউকে) ব্যবহার করা হয়েছিল। ইঁদুরগুলোকে সাবধানে পরিমাপক চেম্বারে রাখা হয়েছিল। পেছনের অঙ্গ দ্বারা প্রযুক্ত ওজন বহনকারী বল ৩ সেকেন্ড সময় ধরে গড় করা হয়েছিল। ওজন বন্টন অনুপাত নিম্নলিখিত সমীকরণ দ্বারা গণনা করা হয়েছিল: [ডান পেছনের অঙ্গের ওজন/(ডান পেছনের অঙ্গের ওজন + বাম পেছনের অঙ্গের ওজন)] × ১০০ [15].

২.৪.৪. সিরাম সাইটোকাইনের মাত্রা পরিমাপ

রক্তের নমুনাগুলোকে ৪°C তাপমাত্রায় ১০ মিনিটের জন্য ১,৫০০ g গতিতে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল; তারপর সিরাম সংগ্রহ করে ব্যবহারের আগ পর্যন্ত −৭০°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। IL-1 এর মাত্রাβ, আইএল-৬, টিএনএফ-αএবং সিরামে PGE2-এর পরিমাণ, প্রস্তুতকারকের নির্দেশাবলী অনুসারে R&D সিস্টেমস (মিনিয়াপোলিস, এমএন, ইউএসএ)-এর ELISA কিট ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল।

২.৪.৫. রিয়েল-টাইম কোয়ান্টিটেটিভ আরটি-পিসিআর বিশ্লেষণ

TRI রিএজেন্ট® (সিগমা-অলড্রিচ, সেন্ট লুইস, এমও, ইউএসএ) ব্যবহার করে হাঁটুর জয়েন্টের টিস্যু থেকে টোটাল আরএনএ নিষ্কাশন করা হয়েছিল, যা রিভার্স-ট্রান্সক্রাইব করে সিডিএনএ-তে রূপান্তরিত করা হয় এবং SYBR গ্রিন সহ একটি TM ওয়ান স্টেপ আরটি পিসিআর কিট (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেমস, গ্র্যান্ড আইল্যান্ড, এনওয়াই, ইউএসএ) ব্যবহার করে পিসিআর-অ্যাম্প্লিফাই করা হয়। অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেমস ৭৫০০ রিয়েল-টাইম পিসিআর সিস্টেম (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেমস, গ্র্যান্ড আইল্যান্ড, এনওয়াই, ইউএসএ) ব্যবহার করে রিয়েল-টাইম কোয়ান্টিটেটিভ পিসিআর সম্পন্ন করা হয়েছিল। প্রাইমার সিকোয়েন্স এবং প্রোব-সিকোয়েন্স টেবিলে দেখানো হয়েছে।1প্রস্তুতকারকের নির্দেশাবলী (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেমস, ফস্টার, সিএ, ইউএসএ) অনুসারে, ডিএনএ পলিমারেজযুক্ত ট্যাকম্যান® ইউনিভার্সাল পিসিআর মাস্টার মিক্সচার ব্যবহার করে নমুনা সিডিএনএ-এর অ্যালিকোট এবং সমপরিমাণ জিএপিডিএইচ সিডিএনএ অ্যামপ্লিফাই করা হয়েছিল। পিসিআর-এর শর্তাবলী ছিল ৪০টি চক্রের জন্য ৫০°C-এ ২ মিনিট, ৯৪°C-এ ১০ মিনিট, ৯৫°C-এ ১৫ সেকেন্ড এবং ৬০°C-এ ১ মিনিট। প্রস্তুতকারকের নির্দেশাবলী অনুসারে, তুলনামূলক সিটি (অ্যামপ্লিফিকেশন প্লট এবং থ্রেশহোল্ডের মধ্যে ক্রস-পয়েন্টে থ্রেশহোল্ড চক্র সংখ্যা) পদ্ধতি ব্যবহার করে টার্গেট জিনের ঘনত্ব নির্ধারণ করা হয়েছিল।

এফওবি মূল্য:মার্কিন ডলার ০.৫ - ৯,৯৯৯ / প্রতি পিস

সর্বনিম্ন অর্ডারের পরিমাণ:১০০টি টুকরা

সরবরাহ ক্ষমতা:প্রতি মাসে ১০০০০ পিস