মোমবাতি এবং সাবান তৈরির জন্য খাঁটি সাপোশনিকোভিয়া ডিভারিকাটা তেল রিড বার্নার ডিফিউজারগুলির জন্য পাইকারি ডিফিউজার অপরিহার্য তেল তৈরির জন্য নতুন

সংক্ষিপ্ত বিবরণ:

 

2.1। SDE এর প্রস্তুতি

SD এর রাইজোমগুলি হ্যানহার্ব কোং (গুরি, কোরিয়া) থেকে শুকনো ভেষজ হিসাবে কেনা হয়েছিল। কোরিয়া ইনস্টিটিউট অফ ওরিয়েন্টাল মেডিসিন (KIOM) এর ডাঃ গো-ইয়া চোই দ্বারা উদ্ভিদের উপাদানগুলি শ্রেণীবিন্যাসগতভাবে নিশ্চিত করা হয়েছিল। একটি ভাউচার নমুনা (সংখ্যা 2014 SDE-6) স্ট্যান্ডার্ড হারবাল রিসোর্সেসের কোরিয়ান হার্বেরিয়ামে জমা করা হয়েছিল। SD (320 গ্রাম) এর শুকনো রাইজোম 70% ইথানল (2 ঘন্টা রিফ্লাক্স সহ) দিয়ে দুবার নিষ্কাশন করা হয়েছিল এবং নির্যাসটি কম চাপে ঘনীভূত হয়েছিল। ক্বাথ ফিল্টার, লাইওফিলাইজড এবং 4 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করা হয়েছিল। অপরিশোধিত প্রারম্ভিক উপকরণ থেকে শুকনো নির্যাসের ফলন ছিল 48.13% (w/w)।

 

2.2। পরিমাণগত উচ্চ-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) বিশ্লেষণ

ক্রোমাটোগ্রাফিক বিশ্লেষণ একটি এইচপিএলসি সিস্টেম (ওয়াটার্স কোং, মিলফোর্ড, এমএ, ইউএসএ) এবং একটি ফটোডিওড অ্যারে ডিটেক্টরের সাথে সম্পাদিত হয়েছিল। SDE-এর HPLC বিশ্লেষণের জন্য, প্রাথমিক-O-গ্লুকোসিলসিমিফুগিন স্ট্যান্ডার্ডটি কোরিয়া প্রমোশন ইনস্টিটিউট ফর ট্র্যাডিশনাল মেডিসিন ইন্ডাস্ট্রি (গিয়েংসান, কোরিয়া) থেকে কেনা হয়েছিল এবংসেকেন্ড-ও-গ্লুকোসিলহামডল এবং 4′-O-β-ডি-গ্লুকোসিল-৫-O-মিথাইলভিসামিনোল আমাদের পরীক্ষাগারের মধ্যে বিচ্ছিন্ন ছিল এবং বর্ণালী বিশ্লেষণ দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছিল, প্রাথমিকভাবে এনএমআর এবং এমএস দ্বারা।

SDE নমুনাগুলি (0.1 মিলিগ্রাম) 70% ইথানলে (10 মিলি) দ্রবীভূত হয়েছিল। ক্রোমাটোগ্রাফিক বিচ্ছেদ একটি XSelect HSS T3 C18 কলাম (4.6 × 250 মিমি, 5) দিয়ে সঞ্চালিত হয়েছিলμm, Waters Co., Milford, MA, USA)। ভ্রাম্যমাণ পর্যায়ে অ্যাসিটোনিট্রিল (A) এবং 0.1% অ্যাসিটিক অ্যাসিড জলে (B) 1.0 মিলি/মিনিট প্রবাহের হারে থাকে। একটি মাল্টিস্টেপ গ্রেডিয়েন্ট প্রোগ্রাম নিম্নরূপ ব্যবহার করা হয়েছিল: 5% A (0 মিনিট), 5-20% A (0-10 মিনিট), 20% A (10-23 মিনিট), এবং 20-65% A (23-40 মিনিট) ) সনাক্তকরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য 210-400 এনএম এ স্ক্যান করা হয়েছিল এবং 254 এনএম রেকর্ড করা হয়েছিল। ইনজেকশন ভলিউম ছিল 10.0μL. তিনটি ক্রোমোন নির্ধারণের জন্য স্ট্যান্ডার্ড সমাধানগুলি 7.781 mg/mL এর চূড়ান্ত ঘনত্বে প্রস্তুত করা হয়েছিল (প্রিম-O-গ্লুকোসিলসিমিফুগিন), 31.125 মিগ্রা/মিলি (4′-O-β-ডি-গ্লুকোসিল-৫-O-মিথাইলভিসামিনোল), এবং 31.125 মিগ্রা/মিলি (সেকেন্ড-ও-গ্লুকোসিলহামডল) মিথানলে এবং 4 ডিগ্রি সেলসিয়াসে রাখা হয়।

2.3। বিরোধী প্রদাহজনক কার্যকলাপ মূল্যায়নভিট্রোতে

2.3.1। কোষ সংস্কৃতি এবং নমুনা চিকিত্সা

RAW 264.7 কোষগুলি আমেরিকান টাইপ কালচার কালেকশন (ATCC, Manassas, VA, USA) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল এবং 1% অ্যান্টিবায়োটিক এবং 5.5% FBS ধারণকারী ডিএমইএম মিডিয়ামে উত্থিত হয়েছিল। 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 5% CO2 এর আর্দ্র বায়ুমণ্ডলে কোষগুলিকে ইনকিউবেট করা হয়েছিল। কোষগুলিকে উদ্দীপিত করার জন্য, মাধ্যমটিকে 1-এ তাজা DMEM মাধ্যম এবং লাইপোপলিস্যাকারাইড (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) দিয়ে প্রতিস্থাপিত করা হয়েছিল।μSDE (200 বা 400) এর উপস্থিতি বা অনুপস্থিতিতে g/mL যোগ করা হয়েছিলμg/mL) অতিরিক্ত 24 ঘন্টার জন্য।

2.3.2। নাইট্রিক অক্সাইড নির্ণয় (NO), প্রোস্টাগ্ল্যান্ডিন E2 (PGE2), টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর-α(TNF-α), এবং Interleukin-6 (IL-6) উৎপাদন

কোষগুলিকে এসডিই দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল এবং 24 ঘন্টার জন্য এলপিএস দিয়ে উদ্দীপিত করা হয়েছিল। পূর্ববর্তী একটি গবেষণা অনুসারে গ্রিস রিএজেন্ট ব্যবহার করে নাইট্রাইট পরিমাপ করে কোন উৎপাদন বিশ্লেষণ করা হয়নি [12]। প্রদাহজনক সাইটোকাইন PGE2, TNF-এর নিঃসরণα, এবং IL-6 প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে একটি ELISA কিট (R&D সিস্টেম) ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল। NO এবং সাইটোকাইন উৎপাদনের উপর SDE-এর প্রভাব 540 nm বা 450 nm এ নির্ধারণ করা হয়েছিল একটি Wallac EnVision ব্যবহার করে™মাইক্রোপ্লেট রিডার (PerkinElmer)।

2.4। Antiosteoarthritis কার্যকলাপ মূল্যায়নভিভোতে

2.4.1। প্রাণী

পুরুষ Sprague-Dawley ইঁদুর (7 সপ্তাহ বয়সী) Samtako Inc. (ওসান, কোরিয়া) থেকে কেনা হয়েছিল এবং 12-ঘন্টা আলো/অন্ধকার চক্রের সাথে নিয়ন্ত্রিত অবস্থায় রাখা হয়েছিল°সে এবং% আর্দ্রতা। ইঁদুরদের একটি পরীক্ষাগার খাদ্য এবং জল সরবরাহ করা হয়েছিলবিজ্ঞাপন লিবিটাম. সমস্ত পরীক্ষামূলক পদ্ধতি ন্যাশনাল ইনস্টিটিউট অফ হেলথ (এনআইএইচ) নির্দেশিকাগুলির সাথে সম্মতিতে সম্পাদিত হয়েছিল এবং ডাইজিয়ন বিশ্ববিদ্যালয়ের (ডেজিয়ন, কোরিয়া প্রজাতন্ত্র) প্রাণীর যত্ন ও ব্যবহার কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল।

2.4.2। ইঁদুরে MIA-এর সাথে OA-এর আনয়ন

অধ্যয়ন শুরুর আগে প্রাণীগুলিকে এলোমেলো করে চিকিত্সার গোষ্ঠীগুলিতে নিয়োগ করা হয়েছিল (প্রতি গ্রুপ)। MIA সলিউশন (3 mg/50μ0.9% স্যালাইনের এল) কেটামাইন এবং জাইলাজিনের মিশ্রণের সাথে প্ররোচিত অ্যানেস্থেশিয়ার অধীনে ডান হাঁটুর অন্তঃস্থিত স্থানে সরাসরি ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। ইঁদুরগুলি এলোমেলোভাবে চারটি গ্রুপে বিভক্ত ছিল: (1) এমআইএ ইনজেকশন ছাড়াই স্যালাইন গ্রুপ, (2) এমআইএ ইনজেকশন সহ এমআইএ গ্রুপ, (3) এমআইএ ইনজেকশন সহ এসডিই-চিকিত্সা করা গ্রুপ (200 মিলিগ্রাম/কেজি), এবং (4) ) ইন্ডোমেথাসিন- (IM-) চিকিত্সা করা গ্রুপ (2 মিগ্রা/কেজি) MIA ইনজেকশন দিয়ে। 4 সপ্তাহের জন্য এমআইএ ইনজেকশনের 1 সপ্তাহ আগে ইঁদুরগুলিকে এসডিই এবং আইএম দিয়ে মৌখিকভাবে পরিচালিত হয়েছিল। এই গবেষণায় ব্যবহৃত SDE এবং IM এর ডোজ পূর্ববর্তী গবেষণায় নিযুক্তদের উপর ভিত্তি করে ছিল [10,13,14].

2.4.3। Hindpaw ওজন বহনকারী বন্টন পরিমাপ

OA আনয়নের পরে, হিন্ডপাজের ওজন বহন করার ক্ষমতার মূল ভারসাম্য ব্যাহত হয়েছিল। একটি অক্ষমতা পরীক্ষক (লিন্টন ইন্সট্রুমেন্টেশন, নরফোক, ইউকে) ওজন বহন সহনশীলতার পরিবর্তনগুলি মূল্যায়ন করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। ইঁদুরগুলি সাবধানে পরিমাপের চেম্বারে স্থাপন করা হয়েছিল। পশ্চাৎ অঙ্গ দ্বারা প্রয়োগ করা ওজন বহনকারী শক্তি 3 সেকেন্ড সময়ের মধ্যে গড় করা হয়েছিল। ওজন বন্টন অনুপাত নিম্নলিখিত সমীকরণ দ্বারা গণনা করা হয়েছিল: [ডান পশ্চাৎ অঙ্গের ওজন/(ডান পশ্চাৎ অঙ্গের ওজন + বাম পশ্চাৎ অঙ্গের ওজন)] × 100 [15].

2.4.4। সিরাম সাইটোকাইন স্তরের পরিমাপ

রক্তের নমুনাগুলিকে 1,500 গ্রাম সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল 10 মিনিটের জন্য 4 ডিগ্রি সেলসিয়াসে; তারপরে সিরাম সংগ্রহ করা হয় এবং ব্যবহার না করা পর্যন্ত −70°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়। IL-1 এর মাত্রাβ, IL-6, TNF-α, এবং সিরামের PGE2 প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে R&D সিস্টেম (Minneapolis, MN, USA) থেকে ELISA কিট ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল।

2.4.5। রিয়েল-টাইম পরিমাণগত RT-PCR বিশ্লেষণ

TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ব্যবহার করে হাঁটুর জয়েন্ট টিস্যু থেকে মোট আরএনএ বের করা হয়েছিল, সিডিএনএ-তে বিপরীতভাবে প্রতিলিপি করা হয়েছিল এবং SYBR সবুজ (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেম) সহ একটি TM ওয়ান স্টেপ আরটি পিসিআর কিট ব্যবহার করে পিসিআর-পরিবর্ধিত হয়েছিল। , গ্র্যান্ড আইল্যান্ড, NY, USA)। ফলিত বায়োসিস্টেম 7500 রিয়েল-টাইম পিসিআর সিস্টেম (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেম, গ্র্যান্ড আইল্যান্ড, এনওয়াই, ইউএসএ) ব্যবহার করে রিয়েল-টাইম পরিমাণগত পিসিআর সঞ্চালিত হয়েছিল। প্রাইমার সিকোয়েন্স এবং প্রোব-সিকোয়েন্স সারণিতে দেখানো হয়েছে1. প্রস্তুতকারকের নির্দেশাবলী (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেম, ফস্টার, সিএ, ইউএসএ) অনুযায়ী ডিএনএ পলিমারেজ ধারণকারী TaqMan® ইউনিভার্সাল পিসিআর মাস্টার মিশ্রণের সাথে নমুনা cDNA-এর অ্যালিকোট এবং সমান পরিমাণ GAPDH cDNA প্রশস্ত করা হয়েছিল। পিসিআর অবস্থা ছিল 50 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে 2 মিনিট, 94 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে 10 মিনিট, 95 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 15 সেকেন্ড এবং 40টি চক্রের জন্য 60 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 1 মিনিট। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে, লক্ষ্য জিনের ঘনত্ব তুলনামূলক Ct (এম্প্লিফিকেশন প্লট এবং থ্রেশহোল্ডের মধ্যে ক্রস-পয়েন্টে থ্রেশহোল্ড সাইকেল নম্বর) পদ্ধতি ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল।

FOB মূল্য:US $0.5 - 9,999 / পিস

ন্যূনতম অর্ডারের পরিমাণ:100 পিস/পিস

সরবরাহ ক্ষমতা:প্রতি মাসে 10000 পিস/পিস