মোমবাতি এবং সাবান তৈরির জন্য বিশুদ্ধ সাপোশনিকোভিয়া ডিভারিকাটা তেল, পাইকারি ডিফিউজার, রিড বার্নার ডিফিউজারগুলির জন্য নতুন প্রয়োজনীয় তেল

ছোট বিবরণ:

 

২.১. এসডিই প্রস্তুতি

SD-এর রাইজোমগুলো হানহার্ব কোং (গুরি, কোরিয়া) থেকে শুকনো ভেষজ হিসেবে কেনা হয়েছিল। কোরিয়া ইনস্টিটিউট অফ ওরিয়েন্টাল মেডিসিন (KIOM) এর ডক্টর গো-ইয়া চোই উদ্ভিদ উপকরণগুলিকে শ্রেণীবদ্ধভাবে নিশ্চিত করেছেন। একটি ভাউচার নমুনা (নম্বর 2014 SDE-6) কোরিয়ান হার্বেরিয়াম অফ স্ট্যান্ডার্ড হার্বাল রিসোর্সেসে জমা করা হয়েছিল। SD-এর শুকনো রাইজোম (320 গ্রাম) দুবার 70% ইথানল (2 ঘন্টা রিফ্লাক্স সহ) দিয়ে বের করা হয়েছিল এবং তারপর নির্যাসটি কম চাপে ঘনীভূত করা হয়েছিল। ক্বাথটি ফিল্টার করা হয়েছিল, লাইওফিলাইজ করা হয়েছিল এবং 4°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। অপরিশোধিত প্রারম্ভিক উপকরণ থেকে শুকনো নির্যাসের ফলন ছিল 48.13% (w/w)।

 

২.২. পরিমাণগত উচ্চ-কর্মক্ষমতা তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) বিশ্লেষণ

ক্রোমাটোগ্রাফিক বিশ্লেষণ একটি HPLC সিস্টেম (ওয়াটার্স কোং, মিলফোর্ড, এমএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) এবং একটি ফটোডায়োড অ্যারে ডিটেক্টর ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল। SDE-এর HPLC বিশ্লেষণের জন্য, প্রাথমিক-O-গ্লুকোসিলসিমিফুগিন স্ট্যান্ডার্ডটি কোরিয়া প্রমোশন ইনস্টিটিউট ফর ট্র্যাডিশনাল মেডিসিন ইন্ডাস্ট্রি (গিয়ংসান, কোরিয়া) থেকে কেনা হয়েছিল, এবংসেকেন্ড-ও-গ্লুকোসিলহামাউডল এবং 4′-O-β-ডি-গ্লুকোসিল-৫-O-মিথাইলভিসামিনল আমাদের পরীক্ষাগারে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল এবং বর্ণালী বিশ্লেষণের মাধ্যমে সনাক্ত করা হয়েছিল, প্রাথমিকভাবে NMR এবং MS দ্বারা।

SDE নমুনা (0.1 মিলিগ্রাম) 70% ইথানল (10 মিলি) দ্রবীভূত করা হয়েছিল। ক্রোমাটোগ্রাফিক পৃথকীকরণ একটি XSelect HSS T3 C18 কলাম (4.6 × 250 মিমি, 5μমি., ওয়াটার্স কোং, মিলফোর্ড, এমএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র)। মোবাইল ফেজটিতে অ্যাসিটোনিট্রাইল (A) এবং 0.1% অ্যাসিটিক অ্যাসিড জলে (B) 1.0 মিলি/মিনিট প্রবাহ হারে ছিল। একটি মাল্টিস্টেপ গ্রেডিয়েন্ট প্রোগ্রাম নিম্নরূপ ব্যবহার করা হয়েছিল: 5% A (0 মিনিট), 5–20% A (0–10 মিনিট), 20% A (10–23 মিনিট), এবং 20–65% A (23–40 মিনিট)। সনাক্তকরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য 210–400 nm স্ক্যান করা হয়েছিল এবং 254 nm রেকর্ড করা হয়েছিল। ইনজেকশনের পরিমাণ ছিল 10.0μL. তিনটি ক্রোমোন নির্ধারণের জন্য স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণগুলি 7.781 mg/mL (প্রাইম-O-গ্লুকোসিলসিমিফুগিন), ৩১.১২৫ মিলিগ্রাম/মিলি (৪′-O-β-ডি-গ্লুকোসিল-৫-O-মিথাইলভিসামিনল), এবং 31.125 মিলিগ্রাম/মিলি (সেকেন্ড-ও-গ্লুকোসিলহামাউডল) মিথানলে এবং ৪° সেলসিয়াসে রাখা হয়।

২.৩। প্রদাহ-বিরোধী কার্যকলাপের মূল্যায়নভিট্রোতে

২.৩.১. কোষ সংস্কৃতি এবং নমুনা চিকিৎসা

RAW 264.7 কোষগুলি আমেরিকান টাইপ কালচার কালেকশন (ATCC, Manassas, VA, USA) থেকে প্রাপ্ত করা হয়েছিল এবং 1% অ্যান্টিবায়োটিক এবং 5.5% FBS ধারণকারী DMEM মাধ্যমে জন্মানো হয়েছিল। কোষগুলিকে 37°C তাপমাত্রায় 5% CO2 এর আর্দ্র পরিবেশে ইনকিউবেট করা হয়েছিল। কোষগুলিকে উদ্দীপিত করার জন্য, মাধ্যমটিকে তাজা DMEM মাধ্যমের সাথে প্রতিস্থাপন করা হয়েছিল, এবং 1°C তাপমাত্রায় লাইপোপলিস্যাকারাইড (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) ব্যবহার করা হয়েছিল।μSDE (200 বা 400) এর উপস্থিতি বা অনুপস্থিতিতে g/mL যোগ করা হয়েছিলμg/mL) অতিরিক্ত 24 ঘন্টার জন্য।

২.৩.২. নাইট্রিক অক্সাইড (NO), প্রোস্টাগ্ল্যান্ডিন E2 (PGE2), টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর নির্ধারণ-α(টিএনএফ-α), এবং ইন্টারলিউকিন-৬ (IL-৬) উৎপাদন

কোষগুলিকে SDE দিয়ে চিকিৎসা করা হয়েছিল এবং LPS দিয়ে 24 ঘন্টা ধরে উদ্দীপিত করা হয়েছিল। পূর্ববর্তী একটি গবেষণা অনুসারে গ্রিস রিএজেন্ট ব্যবহার করে নাইট্রাইট পরিমাপ করে NO উৎপাদন বিশ্লেষণ করা হয়েছিল [12]. প্রদাহজনক সাইটোকাইন PGE2, TNF- এর নিঃসরণα, এবং IL-6 নির্মাতার নির্দেশ অনুসারে একটি ELISA কিট (R&D সিস্টেম) ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল। NO এবং সাইটোকাইন উৎপাদনের উপর SDE এর প্রভাব 540 nm বা 450 nm এ Wallac EnVision ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল।™ এর বিবরণমাইক্রোপ্লেট রিডার (পারকিনএলমার)।

২.৪. অ্যান্টিওস্টিওআর্থারাইটিস কার্যকলাপের মূল্যায়নভিভোতে

২.৪.১। প্রাণী

পুরুষ স্প্রেগ-ডাওলি ইঁদুর (৭ সপ্তাহ বয়সী) সামতাকো ইনকর্পোরেটেড (ওসান, কোরিয়া) থেকে কেনা হয়েছিল এবং ১২ ঘন্টা আলো/অন্ধকার চক্র সহ নিয়ন্ত্রিত অবস্থায় রাখা হয়েছিল।°সে এবং% আর্দ্রতা। ইঁদুরদের পরীক্ষাগারের খাদ্য এবং জল সরবরাহ করা হয়েছিলঅবাধে। সমস্ত পরীক্ষামূলক পদ্ধতি জাতীয় স্বাস্থ্য ইনস্টিটিউট (এনআইএইচ) নির্দেশিকা মেনে সম্পাদিত হয়েছিল এবং ডেজিওন বিশ্ববিদ্যালয়ের (ডেজিওন, কোরিয়া প্রজাতন্ত্র) প্রাণী যত্ন ও ব্যবহার কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল।

২.৪.২. ইঁদুরের ক্ষেত্রে MIA-এর সাথে OA-এর আবেশন

গবেষণা শুরুর আগে প্রাণীদের এলোমেলোভাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল এবং চিকিৎসা গোষ্ঠীতে নিযুক্ত করা হয়েছিল (প্রতি গ্রুপে)। MIA দ্রবণ (3 মিলিগ্রাম/50)μ০.৯% স্যালাইনের এল) কেটামিন এবং জাইলাজিনের মিশ্রণ দিয়ে অ্যানেস্থেসিয়ার অধীনে ডান হাঁটুর আন্তঃআর্টিকুলার স্থানে সরাসরি ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে চারটি দলে ভাগ করা হয়েছিল: (১) MIA ইনজেকশন ছাড়াই স্যালাইন গ্রুপ, (২) MIA ইনজেকশন সহ MIA গ্রুপ, (৩) MIA ইনজেকশন সহ SDE-চিকিৎসা করা গ্রুপ (২০০ মিলিগ্রাম/কেজি), এবং (৪) MIA ইনজেকশন সহ ইন্ডোমেথাসিন- (IM-) চিকিত্সিত গ্রুপ (২ মিলিগ্রাম/কেজি)। MIA ইনজেকশনের ১ সপ্তাহ আগে ৪ সপ্তাহ ধরে ইঁদুরগুলিকে SDE এবং IM দিয়ে মৌখিকভাবে পরিচালিত করা হয়েছিল। এই গবেষণায় ব্যবহৃত SDE এবং IM এর ডোজ পূর্ববর্তী গবেষণায় নিযুক্তদের উপর ভিত্তি করে ছিল [10,13,14].

২.৪.৩. হিন্দপা ওজন বহনকারী বন্টনের পরিমাপ

OA ইনডাকশনের পর, পিছনের পাঞ্জাগুলির ওজন বহন ক্ষমতার মূল ভারসাম্য ব্যাহত হয়। ওজন বহন সহনশীলতার পরিবর্তন মূল্যায়ন করার জন্য একটি ইনক্যাপাসিটিন্স পরীক্ষক (লিন্টন ইন্সট্রুমেন্টেশন, নরফোক, যুক্তরাজ্য) ব্যবহার করা হয়েছিল। ইঁদুরগুলিকে সাবধানে পরিমাপক চেম্বারে স্থাপন করা হয়েছিল। পিছনের পাঞ্জা দ্বারা প্রয়োগ করা ওজন বহনকারী শক্তি 3 সেকেন্ড সময় ধরে গড় করা হয়েছিল। ওজন বন্টন অনুপাত নিম্নলিখিত সমীকরণ দ্বারা গণনা করা হয়েছিল: [ডান পিছনের পাঞ্জা উপর ওজন/(ডান পিছনের পাঞ্জা উপর ওজন + বাম পিছনের পাঞ্জা উপর ওজন)] × 100 [15].

২.৪.৪. সিরাম সাইটোকাইনের মাত্রা পরিমাপ

রক্তের নমুনাগুলি 4°C তাপমাত্রায় 10 মিনিটের জন্য 1,500 গ্রাম সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল; তারপর সিরাম সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং ব্যবহার না করা পর্যন্ত −70°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। IL-1 এর মাত্রাβ, IL-6, TNF-α, এবং সিরামে PGE2 পরিমাপ করা হয়েছিল R&D সিস্টেমস (মিনিয়াপলিস, MN, USA) থেকে ELISA কিট ব্যবহার করে প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে।

২.৪.৫। রিয়েল-টাইম কোয়ান্টেটিভেটিভ আরটি-পিসিআর বিশ্লেষণ

TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ব্যবহার করে হাঁটুর জয়েন্ট টিস্যু থেকে মোট RNA বের করা হয়েছিল, cDNA-তে বিপরীতভাবে প্রতিলিপি করা হয়েছিল এবং SYBR সবুজ (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA) সহ TM One Step RT PCR কিট ব্যবহার করে PCR-পরিবর্ধিত করা হয়েছিল। Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR সিস্টেম (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA) ব্যবহার করে রিয়েল-টাইম পরিমাণগত PCR সঞ্চালিত হয়েছিল। প্রাইমার সিকোয়েন্স এবং প্রোব-সিকোয়েন্স টেবিলে দেখানো হয়েছে।1। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেমস, ফস্টার, সিএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) ডিএনএ পলিমারেজ ধারণকারী TaqMan® ইউনিভার্সাল পিসিআর মাস্টার মিশ্রণ দিয়ে নমুনা সিডিএনএ এবং সমপরিমাণ GAPDH সিডিএনএর পরিমাণ বৃদ্ধি করা হয়েছিল। ৪০টি চক্রের জন্য পিসিআর অবস্থা ছিল ৫০°C তাপমাত্রায় ২ মিনিট, ৯৪°C তাপমাত্রায় ১০ মিনিট, ৯৫°C তাপমাত্রায় ১৫ সেকেন্ড এবং ৬০°C তাপমাত্রায় ১ মিনিট। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে, তুলনামূলক Ct (পরিবর্ধন প্লট এবং থ্রেশহোল্ডের মধ্যে ক্রস-পয়েন্টে থ্রেশহোল্ড চক্র সংখ্যা) পদ্ধতি ব্যবহার করে লক্ষ্য জিনের ঘনত্ব নির্ধারণ করা হয়েছিল।

এফওবি মূল্য:০.৫ মার্কিন ডলার - ৯,৯৯৯ / পিস

ন্যূনতম অর্ডার পরিমাণ:১০০ পিস/পিস

যোগানের ক্ষমতা:প্রতি মাসে ১০০০০ পিস/পিস