অস্টিওআর্থ্রাইটিস (OA) হলো হাড় ও অস্থিসন্ধির একটি দীর্ঘস্থায়ী ক্ষয়জনিত রোগ, যা ৬৫ বছরের বেশি বয়সী জনগোষ্ঠীকে প্রভাবিত করে।
1সাধারণত, অস্টিওআর্থ্রাইটিস (OA) রোগীদের ক্ষতিগ্রস্ত তরুণাস্থি, প্রদাহযুক্ত সাইনোভিয়াম এবং ক্ষয়প্রাপ্ত কনড্রোসাইট হিসেবে রোগ নির্ণয় করা হয়, যা ব্যথা এবং শারীরিক কষ্টের কারণ হয়।
2আর্থ্রাইটিসের ব্যথার প্রধান কারণ হলো প্রদাহের ফলে অস্থিসন্ধির তরুণাস্থির ক্ষয়, এবং যখন তরুণাস্থি মারাত্মকভাবে ক্ষতিগ্রস্ত হয়, তখন হাড়গুলো একে অপরের সাথে ধাক্কা খেতে পারে, যা অসহনীয় ব্যথা এবং শারীরিক কষ্টের কারণ হয়।
3জয়েন্টের ব্যথা, ফোলাভাব এবং শক্ত হয়ে যাওয়ার মতো উপসর্গের সাথে প্রদাহজনক মধ্যস্থতাকারীদের সম্পৃক্ততা সুপ্রতিষ্ঠিত। অস্টিওআর্থ্রাইটিস (OA) রোগীদের ক্ষেত্রে, প্রদাহজনক সাইটোকাইন, যা তরুণাস্থি এবং সাবকন্ড্রাল অস্থির ক্ষয় ঘটায়, তা সাইনোভিয়াল ফ্লুইডে পাওয়া যায়।
4অস্টিওআর্থ্রাইটিস (OA) রোগীদের সাধারণত দুটি প্রধান অভিযোগ হলো ব্যথা এবং সাইনোভিয়াল প্রদাহ। তাই, বর্তমান OA চিকিৎসাগুলোর প্রাথমিক লক্ষ্য হলো ব্যথা এবং প্রদাহ কমানো।
5যদিও নন-স্টেরয়েডাল এবং স্টেরয়েডাল ওষুধসহ অস্টিওআর্থ্রাইটিসের (OA) জন্য উপলব্ধ চিকিৎসা পদ্ধতিগুলো ব্যথা এবং প্রদাহ উপশমে কার্যকর বলে প্রমাণিত হয়েছে, তবে এই ওষুধগুলোর দীর্ঘমেয়াদী ব্যবহারে হৃদপিণ্ড, পরিপাকতন্ত্র এবং বৃক্কের কার্যকারিতার অবনতির মতো গুরুতর স্বাস্থ্যগত পরিণতি দেখা দেয়।
6সুতরাং, অস্টিওআর্থ্রাইটিসের চিকিৎসার জন্য কম পার্শ্বপ্রতিক্রিয়াযুক্ত ও অধিক কার্যকর একটি ঔষধ উদ্ভাবন করতে হবে।
প্রাকৃতিক স্বাস্থ্য পণ্যগুলো নিরাপদ ও সহজলভ্য হওয়ায় ক্রমশ জনপ্রিয় হয়ে উঠছে।
7ঐতিহ্যবাহী কোরিয়ান ঔষধের বিভিন্ন প্রদাহজনিত রোগের বিরুদ্ধে কার্যকারিতা প্রমাণিত হয়েছে, যার মধ্যে আর্থ্রাইটিসও অন্তর্ভুক্ত।
8Aucklandia lappa DC. তার ঔষধি গুণাবলীর জন্য পরিচিত, যেমন ব্যথা উপশমের জন্য 'চি' (qi)-এর সঞ্চালন বৃদ্ধি করা এবং পেট শান্ত করা, এবং এটি ঐতিহ্যগতভাবে একটি প্রাকৃতিক ব্যথানাশক হিসেবে ব্যবহৃত হয়ে আসছে।
9পূর্ববর্তী প্রতিবেদন থেকে জানা যায় যে A. lappa-এর প্রদাহ-বিরোধী বৈশিষ্ট্য রয়েছে [
10,
11], ব্যথানাশক [
12], ক্যান্সার বিরোধী [
13], এবং গ্যাস্ট্রোপ্রোটেক্টিভ [
14] প্রভাব। A. lappa-এর বিভিন্ন জৈবিক কার্যকলাপ এর প্রধান সক্রিয় যৌগগুলির কারণে ঘটে: কস্টুনোলাইড, ডিহাইড্রোকস্টাস ল্যাকটোন, ডাইহাইড্রোকস্টানোলাইড, কস্টাসল্যাকটোন, α-কস্টল, সসুরিয়া ল্যাকটোন এবং কস্টাসল্যাকটোন [
15পূর্ববর্তী গবেষণায় দাবি করা হয়েছে যে কস্টুনোলাইড লাইপোপলিস্যাকারাইড (LPS)-এ প্রদাহ-বিরোধী বৈশিষ্ট্য দেখিয়েছে, যা NF-kB এবং হিট শক প্রোটিন পাথওয়ের নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে ম্যাক্রোফেজকে উদ্দীপিত করে।
16,
17তবে, অস্টিওআর্থ্রাইটিস (OA) চিকিৎসায় A. lappa-এর সম্ভাব্য কার্যকারিতা নিয়ে কোনো গবেষণা করা হয়নি। বর্তমান গবেষণায় (মনোসোডিয়াম-আয়োডোঅ্যাসিটেট) MIA এবং অ্যাসিটিক অ্যাসিড-প্ররোচিত ইঁদুরের মডেল ব্যবহার করে OA-এর বিরুদ্ধে A. lappa-এর চিকিৎসাগত প্রভাব অনুসন্ধান করা হয়েছে।
মনোসোডিয়াম-আয়োডোঅ্যাসিটেট (MIA) প্রাণীদের মধ্যে অস্টিওআর্থ্রাইটিসের (OA) অধিকাংশ যন্ত্রণাদায়ক আচরণ এবং রোগশারীরবৃত্তীয় বৈশিষ্ট্য তৈরি করতে ব্যবহৃত হয়।
18,
19,
20যখন হাঁটুর জয়েন্টে ইনজেকশন দেওয়া হয়, MIA কনড্রোসাইটের বিপাক প্রক্রিয়াকে ব্যাহত করে এবং প্রদাহ ও প্রদাহজনিত উপসর্গ, যেমন তরুণাস্থি এবং সাবকনড্রাল অস্থির ক্ষয়, সৃষ্টি করে, যা OA-এর প্রধান লক্ষণ।
18অ্যাসিটিক অ্যাসিড দ্বারা প্ররোচিত মোচড়ানোর প্রতিক্রিয়াকে প্রাণীদের প্রান্তীয় ব্যথার অনুকরণ হিসাবে ব্যাপকভাবে বিবেচনা করা হয়, যেখানে প্রদাহজনিত ব্যথা পরিমাণগতভাবে পরিমাপ করা যায়।
19ইঁদুরের ম্যাক্রোফেজ কোষ লাইন, RAW264.7, প্রদাহের প্রতি কোষীয় প্রতিক্রিয়া অধ্যয়নের জন্য বহুল ব্যবহৃত হয়। LPS দ্বারা সক্রিয় হলে, RAW264 ম্যাক্রোফেজগুলি প্রদাহজনক পথগুলিকে সক্রিয় করে এবং বিভিন্ন প্রদাহজনক মধ্যস্থতাকারী, যেমন TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, এবং IL-6 নিঃসরণ করে।
20এই গবেষণায় MIA প্রাণী মডেল, অ্যাসিটিক অ্যাসিড-প্ররোচিত প্রাণী মডেল এবং LPS-সক্রিয় RAW264.7 কোষে OA-এর বিরুদ্ধে A. lappa-এর ব্যথা-নিবারক এবং প্রদাহ-বিরোধী প্রভাব মূল্যায়ন করা হয়েছে।
২. উপকরণ ও পদ্ধতি
২.১. উদ্ভিদ উপাদান
পরীক্ষায় ব্যবহৃত A. lappa DC.-এর শুকনো মূলটি এপুলিপ ফার্মাসিউটিক্যাল কোং, লিমিটেড (সিউল, কোরিয়া) থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল। এটি গাচন বিশ্ববিদ্যালয়ের কোরিয়ান মেডিসিন কলেজের ভেষজ ফার্মাকোলজি বিভাগের অধ্যাপক দংহুন লি কর্তৃক শনাক্ত করা হয়েছিল এবং ভাউচার নমুনা নম্বরটি ১৮০৬০৩০১ হিসাবে নথিভুক্ত করা হয়েছিল।
২.২. এ. লাপ্পা নির্যাসের এইচপিএলসি বিশ্লেষণ
একটি রিফ্লাক্স যন্ত্র ব্যবহার করে এ. লাপ্পা নিষ্কাশন করা হয়েছিল (পাতিত জল, ১০০ °C তাপমাত্রায় ৩ ঘণ্টা)। নিষ্কাশিত দ্রবণটি ফিল্টার করা হয়েছিল এবং একটি নিম্নচাপের ইভাপোরেটর ব্যবহার করে ঘনীভূত করা হয়েছিল। −৮০ °C তাপমাত্রায় ফ্রিজ-ড্রাইং করার পর এ. লাপ্পা নির্যাসের ফলন ছিল ৪৪.৬৯%। একটি ১২৬০ ইনফিনিটিⅡ এইচপিএলসি-সিস্টেম (অ্যাজিলেন্ট, পাল অল্টো, সিএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে সংযুক্ত একটি এইচপিএলসি-র মাধ্যমে এ. লাপ্পা-র ক্রোমাটোগ্রাফিক বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। ক্রোমাটিক পৃথকীকরণের জন্য, ৩৫ °C তাপমাত্রায় এক্লিপ্সএক্সডিবি সি১৮ কলাম (৪.৬ × ২৫০ মিমি, ৫ µm, অ্যাজিলেন্ট) ব্যবহার করা হয়েছিল। নমুনার মোট ১০০ মিলিগ্রাম ১০ মিলি ৫০% মিথানলে মিশ্রিত করে ১০ মিনিটের জন্য সনিকেশন করা হয়েছিল। নমুনাগুলোকে ০.৪৫ μm মাপের একটি সিরিঞ্জ ফিল্টার (ওয়াটার্স কর্পোরেশন, মিলফোর্ড, এমএ, ইউএসএ) দিয়ে ছেঁকে নেওয়া হয়েছিল। মোবাইল ফেজের গঠন ছিল ০.১% ফসফরিক অ্যাসিড (A) এবং অ্যাসিটোনাইট্রাইল (B) এবং কলামটি নিম্নরূপে এলুটেড করা হয়েছিল: ০–৬০ মিনিট, ০%; ৬০–৬৫ মিনিট, ১০০%; ৬৫–৬৭ মিনিট, ১০০%; ৬৭–৭২ মিনিট, ০% সলভেন্ট B, যার ফ্লো রেট ছিল ১.০ mL/min। নির্গত তরলটি ১০ μL ইনজেকশন ভলিউম ব্যবহার করে ২১০ nm-এ পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। বিশ্লেষণটি তিনবার পুনরাবৃত্তি করে করা হয়েছিল।
২.৩. প্রাণীর আবাসন ও ব্যবস্থাপনা
৫ সপ্তাহ বয়সী পুরুষ স্প্রাগ-ডাওলি (SD) ইঁদুর এবং ৬ সপ্তাহ বয়সী পুরুষ ICR ইঁদুর সামতাকো বায়ো কোরিয়া (গিয়ংগি-দো, কোরিয়া) থেকে কেনা হয়েছিল। প্রাণীগুলোকে একটি কক্ষে স্থির তাপমাত্রা (২২ ± ২ °C) ও আর্দ্রতা (৫৫ ± ১০%) এবং ১২/১২ ঘণ্টার আলো/অন্ধকার চক্রে রাখা হয়েছিল। পরীক্ষা শুরুর এক সপ্তাহেরও বেশি সময় আগে প্রাণীগুলোকে এই পরিবেশের সাথে পরিচিত করানো হয়েছিল। প্রাণীগুলোকে ইচ্ছামতো খাবার ও জল সরবরাহ করা হয়েছিল। সমস্ত প্রাণী পরীক্ষামূলক পদ্ধতিতে গাচন বিশ্ববিদ্যালয়ের (GIACUC-R2019003) প্রাণী যত্ন ও পরিচালনার বর্তমান নৈতিক নিয়মাবলী কঠোরভাবে অনুসরণ করা হয়েছিল। গবেষণাটি তদন্তকারী-অন্ধ এবং সমান্তরাল পরীক্ষা হিসাবে ডিজাইন করা হয়েছিল। আমরা প্রাণী পরীক্ষামূলক নীতিশাস্ত্র কমিটির নির্দেশিকা অনুসারে安乐死 (安乐死) পদ্ধতি অনুসরণ করেছি।
২.৪. এমআইএ ইনজেকশন এবং চিকিৎসা
ইঁদুরগুলোকে দৈবচয়নের ভিত্তিতে ৪টি দলে ভাগ করা হয়েছিল, যথা শ্যাম, কন্ট্রোল, ইন্ডোমেথাসিন এবং এ. ল্যাপা। ২% আইসোফ্লুরেন O2 মিশ্রণ দিয়ে চেতনানাশক প্রয়োগ করে, পরীক্ষামূলক অস্টিওআর্থ্রাইটিস (OA) ঘটানোর জন্য ইঁদুরগুলোর হাঁটুর জয়েন্টে ইন্ট্রা-আর্টিকুলারভাবে ৫০ μL MIA (৪০ মিগ্রা/মি; সিগমা-অলড্রিচ, সেন্ট লুইস, এমও, ইউএসএ) ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। চিকিৎসাগুলো নিম্নরূপভাবে পরিচালিত হয়েছিল: কন্ট্রোল এবং শ্যাম দলগুলোকে শুধুমাত্র AIN-93G বেসিক ডায়েট দেওয়া হয়েছিল। শুধুমাত্র ইন্ডোমেথাসিন দলকে AIN-93G ডায়েটের সাথে মিশ্রিত ইন্ডোমেথাসিন (৩ মিগ্রা/কেজি) দেওয়া হয়েছিল এবং এ. ল্যাপা ৩০০ মিগ্রা/কেজি দলকে AIN-93G ডায়েটের সাথে সম্পূরক হিসেবে এ. ল্যাপা (৩০০ মিগ্রা/কেজি) দেওয়া হয়েছিল। অস্টিওআর্থ্রাইটিস (OA) ঘটানোর দিন থেকে ২৪ দিন ধরে প্রতিদিন প্রতি ১৯০-২১০ গ্রাম দৈহিক ওজনের জন্য ১৫-১৭ গ্রাম হারে চিকিৎসাগুলো অব্যাহত রাখা হয়েছিল।
২.৫. ওজন বহন পরিমাপ
OA প্রবর্তনের পর, নির্ধারিত সময়সূচী অনুযায়ী ইনক্যাপাসিটেন্স-মিটারটেস্টার৬০০ (IITC লাইফ সায়েন্স, উডল্যান্ড হিলস, CA, USA) ব্যবহার করে ইঁদুরগুলোর পশ্চাৎপদের ভারবহন ক্ষমতা পরিমাপ করা হয়েছিল। পশ্চাৎপদে ওজনের বণ্টন গণনা করা হয়েছিল: ভারবহন ক্ষমতা (%)
