অস্টিওআর্থারাইটিস (OA) একটি দীর্ঘমেয়াদী ক্রনিক ডিজেনারেটিভ হাড়ের জয়েন্টের রোগ যা 65 বছরের বেশি বয়স্ক জনসংখ্যাকে প্রভাবিত করে।
1]। সাধারণত, OA রোগীদের ক্ষতিগ্রস্থ তরুণাস্থি, স্ফীত সাইনোভিয়াম এবং ক্ষয়প্রাপ্ত কনড্রোসাইট নির্ণয় করা হয়, যা ব্যথা এবং শারীরিক কষ্টের কারণ হয় [
2]। আর্থ্রাইটিক ব্যথা প্রধানত প্রদাহের কারণে জয়েন্টে তরুণাস্থির অবক্ষয় দ্বারা সৃষ্ট হয় এবং তরুণাস্থি গুরুতরভাবে ক্ষতিগ্রস্ত হলে হাড় একে অপরের সাথে সংঘর্ষে অসহনীয় ব্যথা এবং শারীরিক কষ্টের কারণ হতে পারে।
3]। ব্যথা, ফোলাভাব এবং জয়েন্টের শক্ত হওয়ার মতো লক্ষণগুলির সাথে প্রদাহজনক মধ্যস্থতাকারীদের জড়িত থাকার বিষয়টি ভালভাবে নথিভুক্ত করা হয়েছে। OA রোগীদের মধ্যে, প্রদাহজনক সাইটোকাইন, যা তরুণাস্থি এবং সাবকন্ড্রাল হাড়ের ক্ষয় ঘটায়, সাইনোভিয়াল তরলে পাওয়া যায় [
4]। OA রোগীদের সাধারণত যে দুটি বড় অভিযোগ থাকে তা হল ব্যথা এবং সাইনোভিয়াল প্রদাহ। তাই বর্তমান OA থেরাপির প্রাথমিক লক্ষ্য হল ব্যথা এবং প্রদাহ কমানো। [
5]। যদিও নন-স্টেরয়েডাল এবং স্টেরয়েডাল ওষুধ সহ উপলব্ধ OA চিকিত্সাগুলি ব্যথা এবং প্রদাহ উপশম করতে কার্যকারিতা প্রমাণ করেছে, এই ওষুধগুলির দীর্ঘমেয়াদী ব্যবহারের ফলে গুরুতর স্বাস্থ্যগত পরিণতি যেমন কার্ডিওভাসকুলার, গ্যাস্ট্রো-ইনটেস্টাইনাল এবং রেনাল ডিসফাংশন রয়েছে।
6]। এইভাবে, অস্টিওআর্থারাইটিসের চিকিত্সার জন্য কম পার্শ্বপ্রতিক্রিয়া সহ আরও কার্যকর ওষুধ তৈরি করতে হবে।
প্রাকৃতিক স্বাস্থ্য পণ্য নিরাপদ এবং সহজলভ্য হওয়ার জন্য ক্রমশ জনপ্রিয় হচ্ছে [
7]। ঐতিহ্যগত কোরিয়ান ওষুধগুলি আর্থ্রাইটিস সহ বেশ কয়েকটি প্রদাহজনক রোগের বিরুদ্ধে কার্যকারিতা প্রমাণ করেছে।
8]। অকল্যান্ডিয়ার লাপ্পা ডিসি। এটির ঔষধি গুণাবলীর জন্য পরিচিত, যেমন ব্যথা উপশম এবং পেট প্রশমিত করার জন্য কিউই এর সঞ্চালন বাড়ানো, এবং এটি ঐতিহ্যগতভাবে প্রাকৃতিক ব্যথানাশক হিসাবে ব্যবহৃত হয়।
9]। পূর্ববর্তী প্রতিবেদনগুলি পরামর্শ দেয় যে এ. লাপ্পা প্রদাহবিরোধী [
10,
11], ব্যথানাশক [
12], ক্যান্সার প্রতিরোধক [
13], এবং গ্যাস্ট্রোপ্রোটেকটিভ [
14] প্রভাব। A. lappa এর বিভিন্ন জৈবিক ক্রিয়াকলাপ এর প্রধান সক্রিয় যৌগগুলির কারণে ঘটে: কস্টুনোলাইড, ডিহাইড্রোকোস্টাস ল্যাকটোন, ডাইহাইড্রোকোস্টুনোলাইড, কস্টুস্ল্যাকটোন, α-কোস্টল, সসুরিয়া ল্যাকটোন এবং কস্টুস্ল্যাকটোন [
15]। পূর্ববর্তী গবেষণায় দাবি করা হয়েছে যে কস্টুনোলাইড লাইপোপলিস্যাকারাইড (এলপিএস) এ প্রদাহ-বিরোধী বৈশিষ্ট্য দেখায়, যা এনএফ-কেবি এবং হিট শক প্রোটিন পথ নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে ম্যাক্রোফেজগুলিকে প্ররোচিত করে।
16,
17]। যাইহোক, OA চিকিত্সার জন্য A. lappa-এর সম্ভাব্য কার্যকলাপের কোন গবেষণাই তদন্ত করেনি। বর্তমান গবেষণায় (মনোসোডিয়াম-আইডোঅ্যাসেটেট) MIA এবং অ্যাসিটিক অ্যাসিড-প্ররোচিত ইঁদুর মডেল ব্যবহার করে OA-এর বিরুদ্ধে A. lappa-এর থেরাপিউটিক প্রভাবগুলি তদন্ত করা হয়েছে।
মনোসোডিয়াম-আইডোঅ্যাসেটেট (এমআইএ) বিখ্যাতভাবে বেশিরভাগ ব্যথার আচরণ এবং পশুদের মধ্যে OA-এর প্যাথোফিজিওলজিকাল বৈশিষ্ট্যগুলি তৈরি করতে ব্যবহৃত হয়।
18,
19,
20]। হাঁটুর জয়েন্টে ইনজেকশনের সময়, এমআইএ কনড্রোসাইট বিপাককে ব্যাহত করে এবং প্রদাহ এবং প্রদাহজনক লক্ষণগুলিকে প্ররোচিত করে, যেমন তরুণাস্থি এবং সাবকন্ড্রাল হাড়ের ক্ষয়, OA এর মূল লক্ষণ
18]। অ্যাসিটিক অ্যাসিড দ্বারা প্ররোচিত রাইথিং প্রতিক্রিয়াকে ব্যাপকভাবে প্রাণীদের পেরিফেরাল ব্যথার অনুকরণ হিসাবে বিবেচনা করা হয় যেখানে প্রদাহজনিত ব্যথা পরিমাণগতভাবে পরিমাপ করা যেতে পারে [
19]। মাউস ম্যাক্রোফেজ সেল লাইন, RAW264.7, জনপ্রিয়ভাবে প্রদাহের সেলুলার প্রতিক্রিয়া অধ্যয়ন করতে ব্যবহৃত হয়। এলপিএস-এর সাথে সক্রিয় হওয়ার পরে, RAW264 ম্যাক্রোফেজগুলি প্রদাহজনক পথগুলিকে সক্রিয় করে এবং TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS এবং IL-6 [
20]। এই গবেষণায় MIA পশুর মডেল, অ্যাসিটিক অ্যাসিড-প্ররোচিত পশুর মডেল এবং LPS-অ্যাক্টিভেটেড RAW264.7 কোষে OA-এর বিরুদ্ধে A. lappa-এর অ্যান্টি-নোসিসেপ্টিভ এবং অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি প্রভাবের মূল্যায়ন করা হয়েছে।
2. উপকরণ এবং পদ্ধতি
2.1। উদ্ভিদ উপাদান
A. lappa DC এর শুকনো মূল। পরীক্ষায় ব্যবহৃত ইপুলিপ ফার্মাসিউটিক্যাল কোং লিমিটেড (সিউল, কোরিয়া) থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল। এটি প্রফেসর ডংহুন লি, হার্বাল ফার্মাকোলজি বিভাগের, কোরিয়ান মেডিসিনের কর্নেল, গ্যাচন ইউনিভার্সিটির দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছিল এবং ভাউচারের নমুনা নম্বরটি 18060301 হিসাবে জমা করা হয়েছিল৷
2.2। A. lappa নির্যাস HPLC বিশ্লেষণ
A. লাপ্পা একটি রিফ্লাক্স যন্ত্রপাতি ব্যবহার করে নিষ্কাশন করা হয়েছিল (পাসিত জল, 100 °C তাপমাত্রায় 3 ঘন্টা)। নিষ্কাশিত দ্রবণটি কম চাপের বাষ্পীভবন ব্যবহার করে ফিল্টার এবং ঘনীভূত করা হয়েছিল। উ: −80 ডিগ্রি সেলসিয়াসের নিচে হিমায়িত-শুকানোর পর লাপ্পা নির্যাসের ফলন ছিল 44.69%। A. lappa-এর ক্রোমাটোগ্রাফিক বিশ্লেষণ একটি 1260 InfinityⅡ HPLC-সিস্টেম (Agilent, Pal Alto, CA, USA) ব্যবহার করে সংযুক্ত একটি HPLC দিয়ে পরিচালিত হয়েছিল৷ রঙিন বিভাজনের জন্য, EclipseXDB C18 কলাম (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) 35 °C তাপমাত্রায় ব্যবহার করা হয়েছিল। মোট 100 মিলিগ্রাম নমুনা 50% মিথানলের 10 মিলিমিটারে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 10 মিনিটের জন্য সোনিকেট করা হয়েছিল। নমুনাগুলি 0.45 μm এর একটি সিরিঞ্জ ফিল্টার (ওয়াটারস কর্পোরেশন, মিলফোর্ড, এমএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) দিয়ে ফিল্টার করা হয়েছিল। মোবাইল ফেজ কম্পোজিশন ছিল 0.1% ফসফরিক অ্যাসিড (A) এবং acetonitrile (B) এবং কলামটি নিম্নরূপ ছিল: 0-60 মিনিট, 0%; 60-65 মিনিট, 100%; 65-67 মিনিট, 100%; 67–72 মিনিট, 0% দ্রাবক বি 1.0 মিলি/মিনিট প্রবাহের হার সহ। 10 μL এর ইনজেকশন ভলিউম ব্যবহার করে 210 এনএম এ বর্জ্য পরিলক্ষিত হয়েছিল। বিশ্লেষণটি তিন প্রতিলিপিতে সম্পাদিত হয়েছিল।
2.3। পশু আবাসন এবং ব্যবস্থাপনা
5 সপ্তাহ বয়সী পুরুষ Sprague-Dawley (SD) ইঁদুর এবং 6 সপ্তাহ বয়সী পুরুষ ICR ইঁদুর সামতাকো বায়ো কোরিয়া (Gyeonggi-do, Korea) থেকে কেনা হয়েছিল। ধ্রুবক তাপমাত্রা (22 ± 2 °C) এবং আর্দ্রতা (55 ± 10%) এবং 12/12 ঘন্টার একটি হালকা/অন্ধকার চক্র ব্যবহার করে প্রাণীদের একটি ঘরে রাখা হয়েছিল। পরীক্ষা শুরু হওয়ার আগে এক সপ্তাহেরও বেশি সময় ধরে প্রাণীদের অবস্থার সাথে পরিচিত ছিল। প্রাণীদের খাদ্য এবং জলের একটি বিজ্ঞাপন লিবিটাম সরবরাহ ছিল। গ্যাচন ইউনিভার্সিটিতে (GIACUC-R2019003) পশুর যত্ন এবং পরিচালনার জন্য বর্তমান নৈতিক নিয়মগুলি সমস্ত প্রাণী পরীক্ষামূলক পদ্ধতিতে কঠোরভাবে অনুসরণ করা হয়েছিল। গবেষণাটি তদন্তকারী-অন্ধ এবং সমান্তরাল ট্রায়াল ডিজাইন করা হয়েছিল। আমরা অ্যানিমেল এক্সপেরিমেন্টাল এথিক্স কমিটির নির্দেশিকা অনুযায়ী ইউথানেশিয়া পদ্ধতি অনুসরণ করেছি।
2.4। MIA ইনজেকশন এবং চিকিত্সা
ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে 4 টি দলে বিভক্ত করা হয়েছিল, যথা শাম, কন্ট্রোল, ইন্ডোমেথাসিন এবং এ. লাপা। 2% আইসোফ্লুরেন O2 মিশ্রণের সাথে চেতনানাশক হওয়ার ফলে, ইঁদুরগুলিকে 50 μL MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ব্যবহার করে হাঁটুর জয়েন্টগুলিতে ইনট্রা-আর্টিকুলারিভাবে পরীক্ষামূলক OA তে নিয়ে যাওয়া হয়েছিল। চিকিত্সাগুলি নিম্নরূপ পরিচালিত হয়েছিল: নিয়ন্ত্রণ এবং শ্যাম গ্রুপগুলি শুধুমাত্র AIN-93G মৌলিক খাদ্যের সাথে বজায় রাখা হয়েছিল। শুধুমাত্র, ইন্ডোমেথাসিন গ্রুপকে AIN-93G ডায়েটে অন্তর্ভুক্ত করা ইন্ডোমেথাসিন (3 mg/kg) প্রদান করা হয়েছিল এবং A. lappa 300 mg/kg গ্রুপ A. lappa (300 mg/kg) এর সাথে সম্পূরক AIN-93G খাদ্যের জন্য বরাদ্দ করা হয়েছিল। প্রতিদিনের ভিত্তিতে প্রতি 190-210 গ্রাম শরীরের ওজনে 15-17 গ্রাম হারে OA আনয়নের দিন থেকে 24 দিন ধরে চিকিত্সা অব্যাহত ছিল।
2.5। ওজন ভারবহন পরিমাপ
ওএ ইনডাকশনের পরে, ইঁদুরের পিছনের অঙ্গগুলির ওজন বহন করার ক্ষমতা পরিমাপ করা হয়েছিল অক্ষমতা-মিটার টেস্টার 600 (আইআইটিসি লাইফ সায়েন্স, উডল্যান্ড হিলস, সিএ, ইউএসএ) নির্ধারিত সময়সূচী অনুসারে। পিছনের অঙ্গে ওজন বন্টন গণনা করা হয়েছিল: ওজন বহন করার ক্ষমতা (%)
